Guia de Amostragem em Microbiologia de Alimentos

ÍNDICE

Setores atendidos

  • Carne
  • Frutos do mar
  • Laticínio
  • Produtos Nutracêuticos
  • Nozes e amêndoas
  • Produtos Assados
  • Bebidas
  • Grãos e cereais
  • Alimentos enlatados e congelados
  • Alimentos preparados
  • Salgadinhos
  • Produtos dietéticos
  • Suplementos alimentares
  • Marca Própria
  • Antimicrobianos
  • Restaurantes
  • Hotelaria e Varejo
  • Alimentos para animais de estimação
  • Ração para animais de fazenda
  • Material de embalagem de alimentos

Testes de patógenos

  • Salmonella
  • Espécies de Listeria
  • Listeria monocytogenes
  • E. coli 0157:H7
  • E. coli produtora de toxina Shiga (STEC)
  • Campylobacter

Teste de Organismos Indicadores

  • APC (Contagem de Placas Aeróbicas)
  • Levedura/Bolor
  • Bactérias do ácido lático
  • E. coli
  • Enterobacteriaceae
  • Staphylococcus aureus

Testes quantitativos de rotina

AnalitoPetrifilmPrato de Despejo
Contagem de placas aeróbicasF102F151
Leveduras e boloresF103F166
Coliformes totais/E. coliF104F157
Staphylococcus aureusF105F183
Painel padrão (inclui o acima)F101F180

Testes quantitativos de rotina

AnalitoVidasBAX (PCR)
SalmonellaF106 (ambiente) F239 (25g) F139 (375g)F192 (ambiente) F190 (25g) F191 (375g)
ListeriaF107 (env) F236 (25g)F193 (env) F187 (25g)
E. coli O157:H7F108 (ambiente) F233 (25g) F129 (375g)F189 (ambiente) F194 (25g) F195 (375g)

Vidas vs. BAX

  • O VIDAS é baseado na tecnologia de ensaio fluorescente ligado a enzimas (ELFA), possui tempos de processamento curtos e extensas validações de matriz.
  • BAX é um ensaio baseado em PCR.
Identificação bacteriana e fúngica realizada por MALDI-TOF MS (VITEK-MS) ou por sequenciamento de DNA.

Estudos de prazo de validade

Estudos de Desafio

A FDA deteve

Comida

  • Pedido mínimo de 50 gramas por patógeno.
  • Mínimo de 50 gramas para todos os testes quantitativos.
  • Coletar a amostra em um recipiente estéril e à prova de vazamentos, garantindo que seja uma amostra representativa.

Esponja

(Para coleta de amostras de superfícies ambientais)

  • Uma esponja por patógeno
  • Uma esponja para todos os testes quantitativos.
  • Normalmente feito em uma área de 4”x4” ou 5”x5”.

Esponja vs. Cotonete

Existem dois tipos de amostradores que podem ser usados para amostragem ambiental: a esponja e o cotonete. A esponja permite coletar amostras em uma área maior do que o cotonete. Ela também suporta mais pressão, possibilitando esfregar a área e quebrar qualquer biofilme presente. Os cotonetes são muito menores do que as esponjas, permitindo o acesso a espaços apertados, frestas e entre equipamentos.

Se você estiver coletando amostras de uma grande superfície plana, uma esponja é a ferramenta adequada. Para cantos e frestas de máquinas e outras áreas de difícil acesso, um cotonete seria a ferramenta apropriada.

  1. Identifique o saco de amostras com um marcador permanente.

    Nota: Se a amostragem for para testes de presença/ausência de patógenos, uma única esponja é necessária para cada teste específico de patógeno. Vários testes quantitativos de indicadores (por exemplo, contagem de placas aeróbicas, coliformes/E. coli, leveduras/fungos) podem ser realizados a partir de uma única esponja.

  2. Abra a embalagem rasgando a parte superior da tira de plástico e usando as abas brancas para puxar.
  3. Mantendo as mãos fora do saco, empurre o cabo da esponja para fora. Segure o cabo e retire a esponja do saco. Tenha cuidado para não tocar no interior da sacola.
  4. Pressione firmemente a parte esponjosa do dispositivo para garantir o contato total com a superfície de amostragem desejada. Mova a esponja para frente e para trás na vertical, aplicando pressão firme. Vire a esponja e mova-a para frente e para trás na horizontal sobre a mesma área, aplicando pressão firme.Girl in a jacket
  5. Após a conclusão da amostragem, insira o apenas a parte da esponja para dentro do saco de amostras pré-etiquetado.
  6. Com as mãos fora do saco, aperte a esponja enquanto gira a alça no sentido anti-horário.
  7. Coloque a esponja separada no fundo do saco e descarte a alça. Dobre a parte superior do saco várias vezes e feche-o bem com a presilha de arame.
  8. Recolha todas as amostras de esponja numa caixa térmica com gelo e envie-as durante a noite para a EMSL Analytical, Inc. As amostras de esponja não devem entrar em contacto direto com o gelo e devem idealmente ser mantidas entre 0 e 8 °C.o C (não congelado) durante o transporte.

Lembretes adicionais:

  • Assegure-se de que os Equipamentos de Proteção Individual (EPIs) adequados sejam utilizados e que as Boas Práticas de Fabricação (BPFs) sejam rigorosamente seguidas durante as atividades de amostragem.
  • Certifique-se de que as amostras de esponja não entrem em contato direto com o produto final para evitar possível contaminação cruzada. Recomenda-se o uso de um recipiente com barreira secundária.
  • Durante a coleta de amostras, esteja atento à sequência das atividades, pois a transferência de amostras de esponja da área de alimentos crus para a área de manipulação do produto final pode aumentar o potencial de contaminação cruzada.
  • Se a amostragem for para testes quantitativos (por exemplo, contagem de placas aeróbicas, leveduras/bolores, coliformes/E. coli) usando métodos Petrifilm, certifique-se de que as esponjas estejam hidratadas com caldo neutralizante HiCap ou caldo Letheen. O tampão neutralizante e o caldo neutralizante D/E contêm compostos químicos que podem interferir nos métodos Petrifilm.
  • Verifique se um formulário de cadeia de custódia (COC) preenchido está incluído no recipiente e se as descrições das amostras correspondem exatamente às etiquetas escritas nas amostras.
Esponja de amostragem #8708925 (simples) #8708941 (dupla)
*A temperatura da esponja ou do cotonete durante o transporte é importante para manter a viabilidade dos microrganismos alvo. Se a esponja ou o cotonete chegar ao laboratório muito frio, os microrganismos podem morrer, o que pode resultar em um falso negativo. Se a esponja chegar ao laboratório muito quente, pode haver um crescimento excessivo de bactérias, que podem competir diretamente com o microrganismo de interesse, causando um falso negativo.
  1. Identifique o tubo de amostra com um marcador permanente.

    Observação: Se a coleta de amostras for para testes de presença/ausência de patógenos, um único swab é necessário para cada teste específico de patógeno. Vários testes quantitativos de indicadores (por exemplo, contagem de placas aeróbicas, coliformes/E. coli, leveduras/fungos) podem ser realizados a partir de um único swab.

  2. Desenrosque a tampa do tubo e remova o excesso de meio pressionando a ponta do cotonete contra a parte interna do tubo.
  3. Retire o cotonete do tubo com cuidado.
  4. Pressione firmemente a ponta do dispositivo para garantir o contato total com a superfície de amostragem desejada. Mova o cotonete para frente e para trás na vertical, aplicando pressão firme e girando-o para garantir que toda a ponta entre em contato com a superfície. Gire o cotonete 90° e mova-o para frente e para trás na horizontal, repetindo o processo de amostragem.Girl in a jacket
  5. Após a coleta da amostra, insira o cotonete no tubo previamente etiquetado e aperte a tampa.
  6. Recolha todas as amostras numa caixa térmica com gelo e envie-as durante a noite para a EMSL Analytical, Inc. As amostras não devem entrar em contacto direto com o gelo e devem ser mantidas, idealmente, entre 0 e 8 °C.o C (não congelado)* durante o transporte.

Lembretes adicionais:

  • Assegure-se de que os Equipamentos de Proteção Individual (EPIs) adequados sejam utilizados e que as Boas Práticas de Fabricação (BPFs) sejam rigorosamente seguidas durante as atividades de amostragem.
  • Certifique-se de que as amostras coletadas com o cotonete não entrem em contato direto com o produto final para evitar o risco de contaminação cruzada. Recomenda-se o uso de um recipiente com barreira secundária.
  • Durante a coleta de amostras, esteja atento à sequência das atividades, pois a transferência de amostras da área de alimentos crus para a área de manipulação do produto acabado pode aumentar o potencial de contaminação cruzada.
  • Se a coleta de amostras para testes quantitativos (por exemplo, contagem de placas aeróbicas, leveduras/bolores, coliformes/E. coli) for realizada utilizando o método Petrifilm, certifique-se de que os swabs estejam hidratados com caldo neutralizante HiCap ou caldo Letheen. O tampão neutralizante e o caldo neutralizante D/E contêm compostos químicos que podem interferir nos métodos Petrifilm.
  • Verifique se um formulário de cadeia de custódia (COC) preenchido está incluído no recipiente e se as descrições das amostras correspondem exatamente às etiquetas escritas nas amostras.
Coletor de amostras Pur-Blue Swab #8708942 (cotonete de 1 ml) #8708928 (cotonete de 10 ml)

*A temperatura da esponja ou do cotonete durante o transporte é importante para manter a viabilidade dos microrganismos alvo. Se a esponja ou o cotonete chegar ao laboratório muito frio, os microrganismos podem morrer, o que pode resultar em um falso negativo. Se a esponja chegar ao laboratório muito quente, pode haver um crescimento excessivo de bactérias, que podem competir diretamente com o microrganismo de interesse, causando um falso negativo.

Testes disponíveis

F006 Alérgeno de peixe
F020 Alérgeno de amendoim
F027 Histamina
F021 Alérgeno de amêndoa
F022 Alérgeno de ovo
F023 Alérgeno de avelã
F024 Alérgeno total do leite
F026 Alérgeno de glúten
F028 Alérgeno de nozes
F006 Alergénios alimentares – especialidade
F029Alérgeno de crustáceos
F030Alérgeno de soja
F034Alérgeno de tremoço (Subcontrato)
F035Alérgeno de mostarda (Subcontrato)
F036Alérgeno de gergelim
F037Alérgeno de caseína (Subcontrato)
F039Alérgeno da castanha-do-pará
F040Alérgeno de Caju (Subcontrato)
F041Alérgeno de pistache (Subcontrato)
F243Caju/Pistache

*Outros alérgenos disponíveis mediante solicitação.

Limites de detecção

A detecção quantitativa está disponível apenas para amostras físicas. Nozes (*), gergelim e amostras de swab foram relatadas apenas qualitativamente.

Nome do testeLimites de detecção
Peixe4 ppm (200 ng/cotonete)
Crusacea20 ppb (10 ug/cotonete)
Histamina2,5 ppm
Ovo1 ppm (2 µg/cotonete)
Leite Total0,4 ppm (1 µg/cotonete)
Glúten5 ppm (4 µg/cotonete)
Soja40 ppb (2 µg/cotonete)
Tremoço2 ppm
Mostarda2 ppm
Sésamo5 ppm (5 µg/cotonete)
Caseína0,2 ppm
Amendoim1 ppm (1 µg/cotonete)
Caju2 ppm
Pistache1 ppm
Castanha-do-Pará*5 ppm (5 µg/cotonete)
Amêndoa*2 ppm (2 µg/cotonete)
Noz*10 ppm (10 µg/cotonete)
Avelã*5 ppm (5 µg/cotonete)
Caju/Pistache*2 ppm (2 µg/cotonete)

Instruções para coleta de amostras do produto final.

Mínimo de 5 gramas por teste. Coloque a amostra do alimento em um saco plástico ou o produto final em sua própria embalagem. Caso a amostra física precise ser refrigerada ou transportada em gelo, favor providenciar o envio de acordo com as normas.

Instruções para coleta de amostras com cotonete

Código do produto EMSL: 87M0017 – $2.00 Cada cotonete
**Os clientes deverão fornecer 1 amostra por alérgeno a ser testado. Não podemos coletar amostras de múltiplos alérgenos em uma única amostra.**.

As amostras coletadas com cotonete serão enviadas ao cliente em gelo e precisarão ser devolvidas a Cinnaminson, NJ, em uma caixa térmica, também com gelo. As amostras devem ser analisadas em até 72 horas após a coleta. Envie-as de volta no mesmo dia da coleta.

NÃO COLETE A AMOSTRA NA SEXTA, SÁBADO OU DOMINGO. Devido ao tempo de espera, colete a amostra e envie-a para o laboratório durante a noite, de segunda a quinta-feira.

Para superfícies secas: Retire o cotonete do suporte de plástico e umedeça-o com a solução tampão fornecida. Passe o cotonete em uma área de 5×5 cm, formando um padrão quadriculado, aplicando pressão para que a haste do cotonete dobre ligeiramente (veja abaixo). Gire a ponta enquanto passa o cotonete para frente e para trás. Quebre a ponta do cotonete em um tubo de 7,5 cm (3 polegadas) fornecido. Usando a pipeta de transferência fornecida, adicione no máximo 2 a 3 gotas da solução tampão. Certifique-se de fechar bem o tubo para evitar vazamentos. Lembre-se de identificar cada amostra claramente.

Para superfícies molhadas: Retire o cotonete do suporte de plástico. NÃO o umedeça antes de usar. Passe o cotonete em uma área de 5×5 cm, formando um padrão quadriculado, aplicando pressão para que a haste do cotonete dobre ligeiramente. Gire a ponta enquanto passa o cotonete para frente e para trás. Quebre a ponta do cotonete em um tubo de 7,5 cm (3 polegadas) fornecido. Usando a pipeta de transferência fornecida, adicione no máximo 2 a 3 gotas da solução tampão. Certifique-se de fechar bem o tubo para evitar vazamentos. Lembre-se de identificar cada amostra claramente.

Instruções de envio

Todas as amostras devem ser enviadas ao laboratório durante a noite, em condições de 4 a 8 °C (devolvidas em caixa térmica com gelo). As amostras físicas podem ser enviadas sem qualquer tratamento prévio. Envie todas as amostras diretamente para nossa sede corporativa: EMSL Analytical, Inc., 200 Route 130 N, Cinnaminson, NJ 08077.

O monitoramento da qualidade do ar em instalações de processamento de alimentos é um componente crucial para a manutenção de um programa abrangente de monitoramento ambiental. Sem um projeto adequado para direcionar o fluxo de ar e um monitoramento ativo do ar nas áreas de processamento, os bioaerossóis podem se tornar uma fonte de contaminação do produto, comprometendo a segurança e a qualidade dos alimentos produzidos. Assim, programas de gestão de segurança e qualidade de alimentos comumente adotados (por exemplo, BRC, SQF) prescrevem a necessidade de gerenciar e monitorar a qualidade microbiológica do ar para controlar o risco de contaminação do produto por bioaerossóis. Além da contaminação direta do produto, os bioaerossóis podem se depositar em superfícies ou equipamentos de processamento e, quando as condições adequadas existem (por exemplo, umidade, matéria orgânica), as superfícies físicas que abrigam contaminantes microbianos têm o potencial de se tornarem vetores de contaminação cruzada. O ar comprimido também pode entrar em contato direto com os produtos alimentícios. Por exemplo, pode ser utilizado para injetar ar em embalagens para proteger produtos alimentícios, como um pacote de batatas fritas, ou para limpar detritos de grandes superfícies que entram em contato com os produtos. Como o ar comprimido pode abrigar microrganismos e contribuir para a contaminação dos produtos acabados, é importante que todos os tipos de sistemas de ar com potencial para segurança e deterioração do produto sejam monitorados continuamente. Ao testar a qualidade microbiológica do ar ambiente e comprimido, os métodos descritos abaixo são estratégias de teste de ar comumente utilizadas:
  • Método de sedimentação (decantação) para monitoramento do ar ambiente
    • Placas de ágar padrão, utilizadas para o crescimento de bactérias e fungos (leveduras e bolores), são expostas diretamente às áreas de interesse por um período de tempo especificado pelo usuário (geralmente 15 minutos). Partículas em suspensão no ar são depositadas na superfície das placas de ágar pela força da gravidade. As placas são incubadas de acordo com os métodos aplicáveis e a contagem de colônias bacterianas ou fúngicas é obtida. Embora o método de sedimentação ofereça uma maneira relativamente simples e barata de coletar amostras de ar ambiente, esse método de amostragem seleciona partículas mais pesadas que se depositam rapidamente, pois depende da força da gravidade para a coleta da amostra.
    • Suprimentos e códigos de teste EMSL
      Teste Código de teste Placa de ágar ID do produto em placa de ágar
      Contagem de placas aeróbicas F163 Ágar triptona de soja (TSA) 8714001
      Leveduras e bolores F164 Ágar extrato de malte (MEA) 8714003
  • Método de impacto para monitoramento do ar ambiente e teste de ar comprimido
    • O método de impactação envolve a aspiração ativa de um volume específico de ar por meio de um vácuo mecânico. Partículas suspensas no ar são aspiradas através de uma placa metálica perfurada e impactadas na superfície de placas de ágar, que são posteriormente incubadas para observar o crescimento bacteriano ou fúngico. Este método tem a vantagem de permitir aos usuários padronizar a quantidade de ar coletada, possibilitando assim a normalização dos dados entre diferentes amostragens. Por outro lado, o método requer o aluguel ou a compra do equipamento, bem como manuseio cuidadoso e treinamento para evitar a contaminação do aparelho antes da amostragem.
    • Suprimentos e códigos de teste EMSL
      Teste Código de teste Placa de ágar ID do produto em placa de ágar
      Contagem de placas aeróbicas F163 Ágar triptona de soja (TSA) 8714001
      Leveduras e bolores F164 Ágar extrato de malte (MEA) 8714003
    • Amostradores de impacto
      Tipo de teste de ar Descrição da Amostra ID do produto Preços de aluguel (diários)
      Ambiente Kit de impacto EMSL VP-400 87RD007 $50 USD
      Amostrador de ar SAS 87RD021 $125 USD
      Comprimido Amostrador SAS Pinocchio Super II 87R5034 $175 USD

Cadeia de Custódia

Deve conter a data e hora da coleta da amostra, bem como a sua origem. Essas informações são necessárias para determinar se as amostras estão dentro do prazo de validade e se são adequadas para análise. Caso deseje o resultado para coliformes totais, informe se prefere o teste de Presença/Ausência (Colilert) (Código de Teste EMSL M017) ou o teste de Enumeração (NMP - Número Mais Provável ou TMP - Técnica de Filtração por Membrana) (Código de Teste EMSL M114).

Coleção de amostras

Todas as amostras de água devem ser coletadas em recipientes estéreis aprovados, que nosso laboratório pode fornecer mediante solicitação. Amostras de água tratada (de sistemas municipais/de distribuição) devem ser decloradas com tiossulfato de sódio (este já está presente nos frascos fornecidos pelo nosso laboratório). Mantenha o frasco de coleta fechado até o momento de ser preenchido no local da coleta.

Amostra de distribuição ou torneira de pia

  1. Remova o arejador da torneira.
  2. Enxágue a torneira com uma solução de água sanitária.
  3. Para limpar a tubulação, abra a torneira completamente e deixe a água correr por dois a três minutos, ou por tempo suficiente para permitir a desobstrução da tubulação.
  4. Reduza o fluxo de água para permitir o enchimento da garrafa sem respingar.
  5. São necessários 100 mL para cada amostra submetida à análise.

Tempos de espera

O tempo de espera para amostras regulatórias é de 30 horas para o método de teste de Presença/Ausência e de 30 horas para o método de filtração por membrana.

Caso o cliente esteja ciente de que os prazos de retenção serão excedidos, mas deseje que a análise prossiga mesmo assim, favor indicar isso na Cadeia de Custódia.

Se os tempos de espera forem excedidos, os resultados serão inválidos e isso será registrado no relatório final.

Prazos de entrega

Os resultados de presença/ausência de coliformes totais (Colilert) ou de enumeração (NMP) podem ser divulgados em 24 horas.

Envio de amostras

Todas as amostras devem ser enviadas refrigeradas, não congeladas, e devem permanecer na posição vertical. O melhor método de envio para essas amostras é utilizar bolsas de gelo, e não garrafas de refrigerante cheias de água congelada, sacos de gelo ou gelo solto. Amostras que não forem enviadas corretamente podem acabar contaminadas ou serem rejeitadas.

Para cumprir o período de espera recomendado de 30 horas, o ideal é coletar a amostra após as 12h, para que o pacote enviado por entrega expressa chegue ao EMSL dentro desse prazo.

Enviar quantidade suficiente de amostras

  • Testes quantitativos (relatados como UFC/g ou UFC/mL)
    • Para todos os testes, é necessário um mínimo de 50 gramas de alimento ou uma única esponja/cotonete.
    • Exemplos: Contagem de placas aeróbicas, Leveduras/Boores, Coliformes/E. coli
  • Testes qualitativos (relatados como presentes ou ausentes)
    • No mínimo 50 gramas de alimento ou uma esponja/cotonete para cada teste de patógeno.
    • Exemplos: Listeria, Salmonella, E. coli O157:H7

Preencha uma Cadeia de Custódia (COC)

  • Os rótulos das amostras correspondem ao ID/descrição da amostra no COC.
  • Os códigos dos testes estão indicados no COC para TODAS as amostras.
  • Instruções especiais são adicionadas, se aplicável (por exemplo, especificações, diluições adicionais, amostragem composta).

Embale as amostras corretamente

  • Prepare uma caixa térmica limpa.
  • Forre o fundo com bolsas de gelo congeladas (no mínimo 2).
  • Coloque uma camada de material isolante (por exemplo, plástico bolha) sobre as bolsas de gelo.
  • Coloque as amostras em um saco selável, feche bem e coloque-as na caixa.
  • Coloque outra camada de material isolante sobre as bolsas de gelo.
  • Forre a parte superior com outra camada de bolsas de gelo congeladas (no mínimo 2).
  • Inclua um formulário de Cadeia de Custódia preenchido. Coloque o formulário dentro de um saco plástico ou mantenha-o isolado para evitar que o documento se molhe com as bolsas de gelo.
  • Feche bem o recipiente
  • Aplique a etiqueta de envio e envie para entrega expressa.

Notas

  • Mantenha as amostras ambientais e do produto acabado separadas (por exemplo, em sacos seláveis individuais) para evitar a contaminação cruzada.
  • Amostras em temperatura ambiente não necessitam de gelo; no entanto, deve-se evitar a exposição a temperaturas extremas.
  • Não congele produtos refrigerados.

Passo 1

Prepare um ambiente limpo
caixa isolada

Etapa 2

Forre o fundo com
compressas frias congeladas

Etapa 3

Coloque uma camada isolante.
material (ex: plástico bolha)

Passo 4

Coloque as amostras

Etapa 5

Coloque outra camada de
material isolante
(ex: plástico bolha)

Passo 6

Forre a parte superior com outra
camada de bolsas de gelo congeladas

Passo 7

Inclua um formulário preenchido.
Formulário de Cadeia de Custódia

Passo 8

Feche bem o recipiente

Passo 9

Aplique a etiqueta de envio e
enviar para entrega durante a noite
entrega para EMSL

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Nova Jersey – Cinnaminson (Corporativo)
200 Route 130 North, Cinnaminson, NJ 08077
(800) 220-3675, c@emsl.com

Flórida – Tampa
5406 Hoover Blvd, Sala 21, Tampa, FL 33634
(813) 280-8752, tampalab@emsl.com

Flórida – Orlando
3303 Parkway Center Court, Orlando, FL 32808
(407) 599-5887, orlandolab@emsl.com

Geórgia – Atlanta
2205 Corporate Plaza Parkway Southeast, Suite 200, Smyrna, GA 30080
(770) 956-9150, atlantalab@emsl.com

Indiana – Indianápolis
6340 CastlePlace Dr., Indianápolis, IN 46250
(317) 803-2997, indianapolislab@emsl.com

Missouri – St. Louis
100 Green Park Industrial Court, St. Louis, MO 63123
(314) 577-0150, saintlouislab@emsl.com

Carolina do Norte – Raleigh
2500 Gateway Centre Boulevard, Suite 600, Morrisville, NC 27560
(919) 465-3900, raleighlab@emsl.com

Texas – Houston
5950 Fairbanks North Houston Rd, Houston, TX 77040
(866) 318-3920, houstonlab@emsl.com

Canadá – Mississauga
2756 Slough Street, Mississauga, ON L4T 1G3
(289) 997-4602, torontolab@emsl.com

Para obter informações adicionais sobre serviços laboratoriais, localização dos laboratórios, envio de amostras e muito mais, visite [link para o site]. www.foodtestinglab.com ou ligue
Nordeste: (800) 220-3675
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